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摘要
目的:探索七氟醚(Sev)后处理(Sev-postC)对右美托咪定(Dex)心肌保护的协同增效作用及其分子机制。方法:将20只31周龄雄性C57BL/6J小鼠随机分为Sham组、缺血/再灌注损伤模型(Model)组、Dex组、Dex+Sev-postC组，每组5只，采用苏木精-伊红(HE)染色和Masson染色检测小鼠心肌损伤情况；酶联免疫吸附试验(ELISA)测定小鼠血清肌钙蛋白I(cTnI)、乳酸脱氢酶(LDH)、脑钠肽(BNP)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)水平。体外实验中将H9c2心肌细胞分为Control组、缺氧/复氧损伤模型(H/R)组、Dex组、Dex+Sev+siRNA NT组和Dex+Sev+巨噬细胞迁移抑制因子(MIF) siRNA组，或Dex+Sev+pcDNA3.1组和Dex+Sev+pcDNA3.1-MIF组，转染MIF siRNA敲低MIF/转染pcDNA3.1-MIF过表达MIF。蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测敲低或过表达MIF的效果，CCK-8法测定细胞存活能力；V-异硫氰酸荧光素(annexin V-FITC)/碘化丙啶(PI)双标记流式细胞术测定细胞凋亡率。结果:小鼠在体实验HE染色与Masson染色结果显示，与Sham组比较，Model组小鼠心肌纤维断裂溶解，梗死处有炎性细胞浸润；心肌纤维化程度明显，胶原蛋白增加；与Model组比较，Dex组和Dex+Sev-postC组心肌损伤明显改善。ELISA检测结果显示，与Sham组比较，Model组血清cTnI、LDH、BNP和CK-MB水平均明显上升(P<0.01);与Model组比较，Dex组、Dex+Sev-postC组血清cTnI、LDH、BNP和CK-MB水平均明显下调(P<0.05或P<0.01);与Dex组比较，Dex+Sev-postC组下调更明显(P<0.05或P<0.01)。体外细胞实验结果显示，Western Blot结果证明在H9c2细胞中成功敲低或过表达MIF。与Control组比较，H/R组细胞存活能力明显降低(P<0.01),细胞凋亡率明显升高(P<0.01)。与H/R组比较，Dex组和Dex+Sev+MIF siRNA组细胞存活能力明显上升(P<0.05),细胞凋亡率明显降低(P<0.01);Dex+Sev+siRNA NT组、Dex+Sev+pcDNA3.1组和Dex+Sev+pcDNA3.1-MIF组心肌细胞存活能力明显上升(P<0.05或P<0.01),细胞凋亡率明显降低(P<0.01),且与Dex+Sev+siRNA NT组比较，Dex+Sev+MIF siRNA组心肌细胞存活能力明显下调(P<0.05),细胞凋亡率明显升高(P<0.05)。结论:Sev-post C通过MIF因子增强右美托咪定对老龄小鼠心肌缺血/再灌注损伤模型的心肌保护作用。
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