H10亚型和N8亚型禽流感病毒三重RT-PCR检测方法的建立

作者：罗思思; 谢芝勋^*; 谢志勤; 谢丽基; 邓显文; 范晴; 黄娇玲; 张艳芳; 王盛; 曾婷婷; 张民秀

来源：中国兽药杂志, 2019, 53(04): 1-5.

DOI：10.11751/ISSN.1002-1280.2019.04.01

• 禽流感病毒
• H10亚型
• N8亚型
• 三重RT-PCR

根据基因库中H10亚型禽流感病毒(AIV)HA基因、N8亚型AIV NA基因和所有亚型AIV M基因序列,分别设计筛选出3对特异性引物,优化引物之间的浓度,建立了H10亚型和N8亚型AIV三重RT-PCR检测方法。该法对含有H10和N8亚型AIV的模板可特异性扩增出267 bp(H10亚型AIV)、464 bp(N8亚型AIV)和693 bp(AIV)目的条带,对H10亚型AIV扩增出267、693 bp目的条带,对N8亚型AIV扩增出464、693 bp目的条带,对其他亚型AIV仅扩增出693 bp目的条带,对常见禽病病原体均未扩增出任何条带。该法对H10亚型和N8亚型AIV检测下限为103拷贝/μL。120份临床样品检测结果与病毒分离鉴定一致。研究建立的H10亚型和N8亚型AIV三重RT-PCR检测方法特异性强、灵敏度高,为同时快速鉴别检测H10亚型和N8亚型AIV提供一种简便、快速和有效的方法。

• 单位
  广西壮族自治区兽医研究所