微小RNA-488靶向调控HMGN5表达及对肺癌细胞侵袭迁移的影响

作者：孙伟; 丁静

来源：临床肿瘤学杂志, 2019, 24(11): 973-977.

• 非小细胞肺癌
• 微小RNA-488
• 侵袭迁移
• 高迁移率族核小体结合域5

目的探讨微小RNA-488(miR-488)对高迁移率族核小体结合域5(HMGN5)的靶向调控作用及非小细胞肺癌(NSCLC)细胞A549侵袭迁移的影响。方法采用实时定量PCR(QPCR)检测正常肺上皮细胞系(BEAS-2B)和A549细胞的miR-488水平。脂质体法向A549细胞转染miR-488模拟物(过表达组)或阴性对照序列(NC组)并设未转染的细胞为对照组。MTT比色法、Transwell实验和划痕愈合实验体外测定A549细胞的增殖、侵袭和迁移能力的变化,QPCR和Western blotting检测HMGN5、基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9的水平;双荧光素酶报告基因实验验证miR-488对HMGN5的靶向调控作用。结果 A549细胞的miR-488水平为0.256±0.028,低于BEAS-2B细胞的1.019±0.124(P<0.05);过表达组的miR-488水平为11.229±2.164,高于对照组的1.051±0.162和NC组的1.029±0.116(P<0.05)。与NC组和对照组相比,过表达组A549细胞转染48、72 h的增殖能力下降(P<0.05);过表达组的划痕愈合率和穿膜细胞数目分别为(25.53±3.75)%和(79.66±9.23)个,低于NC组的(58.56±4.76)%和(172.34±14.67)个及对照组的(54.34±5.65)%和(165.22±11.53)个(P<0.05);miR-488模拟物能降低HMGN5基因3’端非翻译区野生型的荧光素酶活性(P<0.05),但对3’端非翻译区突变型无影响(P>0.05)。与其余两组相比,过表达组的HMGN5、MMP-9和MMP-2水平降低(P<0.05)。对照组和NC组上述指标的差异无统计学意义(P>0.05)。结论 miR-488在NSCLC细胞中低表达,上调该miRNA水平可抑制增殖和迁移侵袭能力并发挥类似抑癌基因的作用,可能与靶向调控HMGN5及抑制MMP-2/MMP-9通路有关,在NSCLC靶向中有一定参考价值。

• 单位
  淮北市人民医院