猴痘病毒特异性单克隆抗体制备及鉴定

作者：管茜茜; 赵莉; 任皎; 黄盼盼; 王慧娟; 陈迎珠; 朱娜; 谭文杰; 阮力; 田厚文^*

来源：中华实验和临床病毒学杂志, 2017, 31(02): 153-156.

• 猴痘病毒
• A29蛋白
• 多肽
• 单克隆抗体

目的制备猴痘病毒特异性单克隆抗体, 建立猴痘病毒免疫荧光检测方法。方法原核表达猴痘病毒A29蛋白及与之同源的痘苗病毒A27蛋白和牛痘病毒162蛋白, 建立抗体筛选系统;使用人工合成的猴痘病毒A2917～49多肽免疫BALB/c小鼠, 取小鼠脾细胞通过融合、克隆和筛选等制备猴痘病毒单克隆抗体。通过ELISA法确定单克隆抗体的特异性及亚型。结果在大肠埃希菌中成功表达A29、A27及162蛋白, 经Western blot鉴定分子量与预期相符, 带his标签的三种蛋白经His-Bind亲和层析柱纯化后纯度均大于90%;用纯化蛋白筛选获得8株A29蛋白特异的单克隆抗体, 其中两株为IgG3型, 其余为IgG1型。结论本研究获得8株猴痘病毒特异性单克隆抗体, 为进一步建立猴痘病毒免疫荧光检测奠定基础。

• 单位
  中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所