摘要

研究腔前卵泡的体外培养可以深入了解卵泡发育生长机理以及卵母细胞与周围颗粒细胞、膜细胞之间信息交流机制。猪卵巢采用机械法分离卵泡,随机分为五组:基础培养组、MT10-11M组、MT10-9M组、MT10-7M组、DMSO组。基础培养组以DMEM/F12为基础培养基,添加10 mU FSH、7.5%FBS、1%ITS、100μg/mL L-AA进行培养;MT10-11M组、MT10-9M组、MT10-7M组、DMSO组分别在上述培养基中加入10-11M、10-9M、10-7M浓度的MT及0.1‰浓度的DMSO后培养。在37℃、5%CO2培养箱中培养4 d,每48 h更换半量培养液一次,每次50μL。培养结束后进行分组收样,进行RNA表达水平的分析比较。在本实验研究浓度范围内,褪黑素对于体外培养猪腔前卵泡的生长没有显著影响。在体外培养体系中添加褪黑素具有抑制卵泡细胞凋亡的作用,其中10-9M浓度的MT抗凋亡效果最明显。