摘要
目的建立乙型肝炎病毒(HBV)阳性血清体外感染人肝癌细胞(HepaRG)的实验模型, 并探索入胞抑制剂Myrcludex-B在体外感染模型中对HBV的抑制作用。方法将诱导成熟的HepaRG细胞分成加聚乙二醇(PEG)的感染组和无PEG的感染组, 再将两种感染组分别分为添加Myrcludex-B肽段的处理组和不添加Myrcludex-B肽段的对照组, 用HBV DNA阳性患者的血清对细胞进行感染。取细胞上清液, 用荧光定量PCR检测上清液中HBV DNA的表达量, 用化学荧光法检测细胞上清液中HBsAg、HBeAg的含量。两组间计量资料不服从正态分布的采用秩和检验, 服从正态分布的采用t检验, 以P < 0.05为差异有统计学意义。结果在处理组中, 加PEG感染组和不加PEG感染组的病毒滴度分别为(103 877.00±49 013.24)拷贝/ml、(5 050.09±631.26)拷贝/ml;在对照组中, 加PEG感染组和不加PEG感染组的病毒滴度分别为(116 188.57±50 957.19)拷贝/ml、(5 119.34±1 102.43)拷贝/ml, 两组中加PEG感染组的病毒滴度显著高于不加PEG感染组(P < 0.05), 差异有统计学意义。在加PEG的感染组中, 加肽段处理组和无肽段对照组的病毒滴度分别为(103 877.34±49 013.24)拷贝/ml、(116 188.57±50 957.19)拷贝/ml, 加肽段处理组病毒滴度明显下降(P < 0.05), 差异有统计学意义;该组0、1、2、3 d上清液中HBsAg的含量均为阳性, 且0 d上清液中加肽段处理组的HBsAg较无肽段对照组呈明显下降趋势。结论用添加PEG的HBV DNA阳性血清体外感染HepaRG细胞的实验模型是可行的, 且在该试验模型中, 入胞抑制剂Myrcludex-B对HBV感染存在一定的抑制作用。
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单位山西医科大学; 山西医科大学第一医院; 第一临床医学院