BIGH3~(R555W)突变转基因小鼠模型的建立

作者：廖昕; 王方; 崔红平

来源：同济大学学报(医学版), 2013, (05): 11-15.

• BIGH3基因
• 显微注射
• 转基因小鼠 BIGH3 gene
• microinjection
• transgenic mice

目的建立BIGH3~(R555W)突变转基因角膜营养不良小鼠模型。方法构建以磷酸甘油酸激酶(phosphoglycerate kinase,PGK)为启动子的BIGH3(M)-IRES-EGFP重组质粒载体,通过原核显微注射方法将线性化、纯化后的外源质粒注射入C57小鼠受精卵中,胚胎移植入假孕受体母鼠输卵管内,获得子代小鼠。用PCR方法检测子代鼠尾基因组DNA,通过RT-PCR及Western印迹法检测BIGH3~(R555W)基因表达。结果 8只假孕小鼠共移植注射后的胚胎84枚,出生35只子代鼠,经PCR检测得到4只转基因阳性小鼠。RT-PCR和Western印迹法检测结果显示,BIGH3~...

• 单位
  同济大学; 同济大学附属东方医院