人乳头瘤病毒16型L1的表达、病毒样颗粒组装及其免疫原性研究

作者：刘微; 郭明旸; 纪莉婷; 韩亚如; 谢文静; 王会岩^*

来源：中国人兽共患病学报, 2018, 34(08): 684-688.

• 人乳头瘤病毒
• 宫颈癌
• 病毒样颗粒
• 原核表达

目的在原核表达系统中表达HPV16L1蛋白,纯化后在体外自组装成VLPs并鉴定。方法优化GenBank中HPV16L1基因序列并截短C末端25个氨基酸,构建至原核表达载体pET-28a上,获得重组表达载体pET28a-16L1△C25。采用镍亲和层析法纯化超声上清,于体外解组装-重组装HPV16VLPs,采用动态光散射和透射电镜进行形貌分析,纯化后于第0、2和4周免疫小鼠,假病毒中和试验检测HPV16VLPs免疫后血清中和抗体。结果双酶切和测序结果表明成功构建pET28a-16L1△C25重组质粒,诱导表达后,经SDS-PAGE和Western blotting分析显示表达的L1蛋白大部分以可溶性形式存在,纯化后的蛋白样品于体外重新组装,动态光散射和透射电镜能够观察到形态与天然病毒颗粒相似的VLPs,第6周小鼠血清中和抗体滴度Log10平均值达到4.43。结论利用原核表达系统成功表达了截短型HPV16L1蛋白,并于体外组装成结构完整的VLPs,且具有较好的免疫原性,为低成本HPV预防性疫苗的研发奠定基础。

• 单位
  吉林医药学院