组蛋白甲基转移酶MLL1促进肾小管上皮细胞转分化

作者：刘晓宇; 李宸羽; 刘航; 赵晴; 徐岩^*

来源：中华肾脏病杂志, 2018, 34(04): 295-301.

• 甲基化
• 组蛋白赖氨酸N-甲基转移酶
• 纤维化
• 上皮间质转分化

目的检测组蛋白甲基转移酶MLL1在单侧输尿管梗阻(UUO)所导致的肾间质纤维化过程中的表达, 探讨其在肾小管上皮细胞间质转分化(EMT)中的作用。方法将42只雄性SD大鼠随机分为正常组, 假手术组, UUO术后1 d、1周、2周、3周和4周组, 利用实时荧光定量PCR和Western印迹法分别检测大鼠肾组织MLL1、Ⅲ型胶原纤维(Col3α1)的表达及EMT的情况。利用siRNA-MLL1质粒抑制HK-2细胞中MLL1基因的表达后, 以TGF-β1进行诱导处理, Western印迹法检测细胞中MLL1、EMT相关指标、Col3α1及组蛋白H3第4位赖氨酸三甲基化(H3K4me3)的蛋白水平;同时利用染色质免疫共沉淀(CHIP)对EMT相关基因启动子区域H3K4me3水平进行检测。结果 (1)与正常和假手术组相比, UUO术后大鼠的肾功能随着梗阻时间的增加不断丧失(P<0.05)。(2)与正常和假手术组相比, UUO术后1周和2周时大鼠肾组织肾间质纤维化最为显著(均P<0.05), MLL1及EMT相关指标的表达量也最高(均P<0.05)。(3)与对照组相比, 3 ng/ml的TGF-β1作用细胞后MLL1的表达量最高(P<0.05), 而在此浓度下HK-2细胞发生EMT也最为显著(P<0.05)。(4)将MLL1敲除后, 3 ng/ml TGF-β1所诱导的HK-2细胞EMT被显著抑制(P<0.05), α-SMA和Vimentin启动子区域的H3K4me3水平也显著下降(P<0.05)。结论 MLL1能够促进TGF-β1所诱导的HK-2细胞EMT的发生, 其机制可能是使α-SMA和Vimentin启动子区的组蛋白H3第4位赖氨酸发生三甲基化(H3K4me3)。

• 单位
  青岛大学附属医院