摘要

目的:建立矿泉水中大肠菌群、粪链球菌、铜绿假单胞菌和产气荚膜梭菌的多重荧光PCR检测法。方法:确定上述4种致病菌的种属范围,检索16S rRNA序列,设计引物和探针;设立阳性、阴性、空白对照,检查方法特异性;制作阳性质粒稀释梯度,探索方法检出限;调取30批次实际样品,验证方法实用性。结果:建立的多重荧光PCR法可准确检测大肠菌群、粪链球菌、铜绿假单胞菌及产气荚膜梭菌,检出限低至102 copies·μL-1;在实际样品的方法比对中与标准培养法结果相同。结论:多重荧光PCR法可有效缩短饮用水中致病菌的检测时间并减少实验操作,具有一定实用价值。

  • 单位
    贵州中烟工业有限责任公司; 贵州省产品质量监督检验院