摘要
目的探讨微型角膜刀法准分子激光角膜上皮瓣下磨镶术(Epi-LASIK)与乙醇浸润法准分子激光角膜上皮瓣下磨镶术(LASEK)对角膜基质细胞的影响研究。方法 50只新西兰大白兔随机编号,其中48只(96只眼)随机一只眼行 Epi-LASIK,另一只眼行 LASEK,余2只(4只眼)未进行手术,作为对照组。采用核苷酸末端转移酶介导的 dUTP 缺口标记(TUNEL)法观察角膜基质细胞的凋亡情况、Ki-67和α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的免疫组化和免疫印迹法测定角膜组织α-SMA 蛋白来观察角膜基质细胞的增殖与向肌成纤维母细胞转化情况,进行计数与半定量分析,对 haze 形成影响进行分析。结果 Epi-LASIK 与 LASEK 术后角膜基质中均有较多的 TUNEL 阳性细胞出现,在术后24h 达最高峰,LASEK 术后1周内细胞凋亡情况较 Epi-LASIK 明显(t=3.63、7.80、4.34、2.95,均P<0.01)。术后1周基质 Ki-67阳性细胞表达增高,72h 时达高峰,两组在1周内差异有统计学意义(t=3.81、5.85、5.09、5.59,均 P<0.01)。α-SMA 阳性细胞在术后1周明显出现,3个月时仍有较高表达,在术后1个月时阳性细胞数达高峰,α-SMA 蛋白表达量的情况与α-SMA 阳性细胞数变化一致,均提示 LASEK 术后增高的情况较 Epi-LASIK 差异有统计学意义(t=2.97、7.19、6.73,均 P<0.01)。结论 Epi-LASIK 较 LASEK 有着更少的角膜基质细胞凋亡、更弱的增殖以及向肌成纤维母细胞的转化,提示 Epi-LASIK 较 LASEK 有着更轻的 haze 反应几率。
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