摘要
为探究MYB44基因在番茄生长发育中的生物学功能。本试验采用CRISPR/Cas9系统构建敲除突变体,根据MYB44基因的外显子设计sg RNA,酶切后与载体pKSE-401连接转化大肠杆菌,然后通过helper菌介导转移到农杆菌LBA4404中,形成重组菌,再应用农杆菌转化法将重组菌侵染番茄子叶外植体,经过抗生素的抗性培养基严格筛选,直至长出幼苗,最终提取DNA进行测序,获得3个独立的敲除转基因株系。
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单位重庆大学; 生物工程学院