自噬标志物LC3的节律表达破坏参与β1-AA诱导的H9c2大鼠心肌细胞死亡

作者：贾微微; 宁娜; 孙聪; 李朋佳; 陆洁蓓; 张晟; 原媛; 王丽; 王晓晖^*

来源：中国病理生理杂志, 2021, 37(01): 10-17.

• 心肌细胞
• β1-肾上腺素受体自身抗体
• 微管相关蛋白1轻链3
• 昼夜节律
• 自噬

目的:探讨β1-肾上腺素受体(β1-AR)自身抗体(β1-AA)对大鼠心肌细胞自噬标志物微管相关蛋白1轻链3(LC3)节律表达的影响及其在心肌细胞死亡中的作用。方法:实验材料为Sprague-Dawley(SD)大鼠和H9c2大鼠心肌细胞。将SD大鼠随机分为免疫组(β1-AR组)和对照(control)组,每组6只;将H9c2细胞随机分为control组、β1-AA组、慢病毒(LV)-NC组和LV-shPer2组(n=6);合成β1-AR细胞外第二环抗原肽段,用于主动免疫大鼠,并使用亲和层析法从大鼠血清中提纯β1-AA;β1-AA处理H9c2细胞24 h后使用CCK-8法检测细胞活力;用地塞米松同步化细胞后,再给予β1-AA处理,采用real-time PCR及Western blot法检测LC3的表达情况,采用Western blot法检测生物钟蛋白Per2的表达情况,使用JTKCYCLE算法分析昼夜节律参数;用LV-shPer2感染H9c2细胞以破坏LC3的节律表达,进而采用CCK-8法检测细胞活力。结果:β1-AR组大鼠血清中β1-AA的A值与control组相比显著升高(P<0.05)。β1-AA组H9c2细胞的活力显著低于control组(P<0.05)。β1-AA可破坏H9c2细胞LC3和Per2的节律表达(JTKCYCLE P<0.05)。通过LV-shPer2干扰Per2基因而破坏H9c2细胞LC3节律表达(JTKCYCLE P<0.05)后,细胞活力显著降低(P<0.05)。结论:β1-AA破坏H9c2大鼠心肌细胞自噬标志物LC3的节律表达,从而促进细胞死亡。

• 单位
  山西医科大学; 基础医学院