紫草素调控MicroRNA-382-5p抑制人增生性瘢痕成纤维细胞纤维化

作者：唐玉婷; 贺茜; 万瑀; 王建军; 杨安宁; 吴凯; 焦运; 白志刚; 姜怡邓; 沈江涌^*

来源：中国组织工程研究, 2023, 27(35): 5642-5648.

• 紫草素
• MicroRNA-382-5p
• 增生性瘢痕
• 正常皮肤
• 成纤维细胞
• 胶原沉积
• 细胞迁移

背景：目前已有研究表明紫草素具有治疗增生性瘢痕的潜力，且miRNA参与增生性瘢痕的病理机制调控，猜测紫草素有可能通过影响miRNA调控增生性瘢痕的发生发展。目的：探讨紫草素通过影响MicroRNA-382-5p对人增生性瘢痕成纤维细胞纤维化的作用机制。方法：收集宁夏医科大学总医院烧伤整形外科提供的增生性瘢痕组织及瘢痕旁正常皮肤组织(瘢痕旁3 cm以内)，并分别分离出人增生性瘢痕成纤维细胞和正常成纤维细胞用于后续实验。苏木精-伊红染色鉴定正常皮肤和增生性瘢痕；免疫荧光鉴定成纤维细胞；采用实时荧光定量PCR从组织水平检测MicroRNA-382-5p相对表达水平。将增生性瘢痕成纤维细胞随机分为紫草素组(紫草素溶于二甲基亚砜配成浓度为13.46μmol/L的药物干预细胞24 h)、二甲基亚砜组、MicroRNA-382-5p阴性对照组、MicroRNA-382-5p抑制组、紫草素+MicroRNA-382-5p阴性对照组及紫草素+MicroRNA-382-5p过表达组。实时荧光定量PCR检测Ⅰ型胶原蛋白α1、Ⅲ型胶原蛋白α1和α-平滑肌肌动蛋白mRNA表达；Western blot检测Ⅰ型胶原蛋白α1、Ⅲ型胶原蛋白α1和α-平滑肌肌动蛋白的蛋白表达；CCK-8法检测细胞活性；划痕实验检测细胞迁移能力。结果与结论：(1)与正常皮肤成纤维细胞相比，增生性瘢痕成纤维细胞增殖活性更强(P <0.01);(2)与二甲基亚砜组相比，紫草素组可以下调增生性瘢痕成纤维细胞中Ⅰ型胶原蛋白α1、Ⅲ型胶原蛋白α1和α-平滑肌肌动蛋白的表达水平(m RNA:P <0.01，蛋白：P <0.01)，并抑制增生性瘢痕成纤维细胞迁移(P <0.05);(3)与正常皮肤相比，Micro RNA-382-5p在增生性瘢痕中呈高表达(P <0.01)，且紫草素能下调增生性瘢痕成纤维细胞中MicroRNA-382-5p的表达(P <0.01);(4)敲低MicroRNA-382-5p能下调增生性瘢痕成纤维细胞中Ⅰ型胶原蛋白α1、Ⅲ型胶原蛋白α1和α-平滑肌肌动蛋白的表达水平(mRNA:P <0.01，蛋白：P <0.01)，并抑制增生性瘢痕成纤维细胞迁移(P <0.05);(5)过表达MicroRNA-382-5p能上调在紫草素影响下增生性瘢痕成纤维细胞中Ⅰ型胶原蛋白α1、Ⅲ型胶原蛋白α1和α-平滑肌肌动蛋白的表达水平(mRNA:P <0.01，蛋白：P <0.01)，并促进增生性瘢痕成纤维细胞迁移(P <0.01);(6)提示紫草素可通过下调MicroRNA-382-5p的表达抑制增生性瘢痕成纤维细胞的纤维化和迁移。

• 单位
  宁夏医科大学; 基础医学院; 宁夏回族自治区人民医院; 宁夏医科大学总医院