大鼠膜联蛋白A_2真核表达载体的构建及表达

作者：刘庆梅; 怀娟; 张杨; 姜虹; 岳寿伟

来源：中国康复医学杂志, 2010, (10): 937-941+952.

• 背根神经节
• 膜联蛋白A2
• 真核表达载体
• Western印迹
• 免疫荧光 dorsal root ganglia
• annexinⅡ
• eukaryotic expression vector
• Western blot
• immunofluorescence

目的:克隆大鼠背根神经节膜联蛋白A2(annexin Ⅱ)的基因,构建真核表达载体并检测其表达。方法:以RT-PCR法扩增大鼠背根神经节(DRG)细胞中膜联蛋白A2(annexin Ⅱ)的基因,构建pGMT-Anxa2克隆载体,以此为模板插入flag标签扩增Anxa2-flag序列,将其定向插入真核表达载体pcDNA3.1( ),获得表达载体pcDNA3.1( )-Anxa2-flag。以PCR、双酶切及序列测定法鉴定该质粒。以脂质体法将表达载体转染到HEK293细胞中,Western印迹和细胞免疫荧光检测annexin Ⅱ蛋白表达及细胞内定位。结果:PCR扩增Anxa2-flag片段大小与预...

• 单位
  山东大学齐鲁医院