小鼠抗人ABHD16A多克隆抗体制备

作者：许君; 薛继初; 姬凯; 李小玲; 徐朝

来源：河南农业大学学报, 2020, 54(02): 262-268.

DOI：10.16445/j.cnki.1000-2340.2020.02.002

• ABHD16A
• 原核表达
• 包涵体纯化
• 多克隆抗体
• 先天免疫

克隆并原核表达人含α/β水解酶结构域丝氨酸酶16A(ABHD16A)基因,制备小鼠抗ABHD16A多克隆抗体。采用反转录PCR克隆ABHD16A的cDNA序列,对该序列进行同源性分析,将克隆的ABHD16A cDNA序列克隆至原核表达载体pET-28a(+)导入E.coli BL21(DE3)进行原核表达,将纯化ABHD16A的重组蛋白免疫小鼠制备多克隆抗血清。研究结果显示,人ABHD16A cDNA序列长度为1 677 bp,序列高度保守,并具有保守的脂肪酶样基序和相应的功能区,原核表达的重组ABHD16A蛋白免疫小鼠后制备的多克隆抗血清在1∶5 000的稀释度具有较好的抗原抗体结合活性。成功制备了小鼠抗人ABHD16A多克隆抗体。

• 单位
  河南农业大学