丁酸钠对嗜水气单胞菌生长及毒力的影响

作者:曾成容; 刘馨; 毕文文; 梅世慧; 何广霞; 张峻杰; 文明*; 周碧君*; 陈江凤; 姜海波
来源:中国畜牧兽医, 2023, 50(07): 2987-2997.
DOI:10.16431/j.cnki.1671-7236.2023.07.038

摘要

【目的】探究丁酸钠对嗜水气单胞菌生长和毒力的影响,评估丁酸钠对嗜水气单胞菌的抑菌活性,并探索其作用机制。【方法】通过微量肉汤稀释法测定丁酸钠对嗜水气单胞菌的最小抑菌浓度(MIC),采用泳动和集群运动试验检测丁酸钠对嗜水气单胞菌的运动状态的影响,使用酶活性和溶血性试验检测丁酸钠对嗜水气单胞菌的脂肪酶、蛋白酶和溶血性的影响,生物膜试验检测丁酸钠对嗜水气单胞菌生物膜的抑制作用,实时荧光定量PCR技术检测丁酸钠对嗜水气单胞菌毒力和群体感应系统的相关基因表达的影响。【结果】丁酸钠对3株嗜水气单胞菌的MIC均>512 mg/L;丁酸钠浓度≤512 mg/L时,不影响3株嗜水气单胞菌的生长。当丁酸钠浓度≥64 mg/L时,除对GZ-SS2019的集群运动能力无显著影响(P>0.05)外,均能显著抑制3株嗜水气单胞菌的运动能力(P<0.05),此浓度下还显著抑制3株嗜水气单胞菌生物膜的形成(P<0.05)。在丁酸钠浓度为128 mg/L时,对3株嗜水气单胞菌脂肪酶活性无显著影响(P>0.05),却显著抑制3株嗜水气单胞菌蛋白酶活性(P<0.05);而丁酸钠浓度≥32 mg/L时,除对GZDX-01的抑制效果不显著(P>0.05)外,能显著降低其余2株嗜水气单胞菌溶血率(P<0.05)。实时荧光定量PCR结果显示,丁酸钠浓度≥128 mg/L时能显著降低群体感应系统luxS和ahyR基因表达量(P<0.05);溶血相关基因aerA表达量显著下降(P<0.05),此外ompW、ompA、fur基因表达量也显著下降(P<0.05)。【结论】丁酸钠浓度≤512 mg/L时不影响嗜水气单胞菌的生长,但能有效干扰嗜水气单胞菌的运动状态、酶活性、溶血性及生物膜的形成,以及毒力基因和群体感应系统相关基因的表达,其中丁酸钠浓度≥128 mg/L时效果较好。