KPNA2表达载体的构建及其对骨肉瘤细胞生长的影响

作者:董文刚; 刘锐; 王飞; 沈伟伟; 黄强; 李闯斌; 李文波; 王伟; 薛云; 高秋明*
来源:现代肿瘤医学, 2019, 27(17): 2988-2991.

摘要

目的:通过分子克隆构建KPNA2过表达载体,探究其对骨肉瘤细胞143B生长的影响。方法:利用Trizol法提取Hela细胞总RNA,而后通过PCR反应扩增KPNA2基因,将扩增产物克隆至表达载体pcDNA3.1+构建KPNA2过表达质粒。通过qPCR实验和Western blot实验检测KPNA2过表达载体转染143B细胞后的表达效率。利用CCK-8、平板克隆形成实验检测143B细胞的增殖状况,利用流式细胞术检测143B细胞的周期分布。结果:qPCR实验和Western blot实验均表明KPNA2过表达质粒转染后,143B细胞内KPNA2表达水平显著上调。CCK-8、平板克隆形成实验结果证实KPNA2上调能够促进143B细胞增殖。流式细胞术结果表明过表达KPNA2能够加快143B细胞周期进程。结论:KPNA2能够促进骨肉瘤细胞系143B生长,为骨肉瘤早期诊断和靶向治疗提供实验依据和理论基础。