人IL-10基因的克隆表达及表达产物活性的初步鉴定

作者：孙杰; 李伯安; 戚扬; 周继文; 朱雷; 迟淑萍; 程云

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2007, (03): 220-222.

• IL-10
• 克隆
• 原核表达 IL-10
• cloning
• prokaryotic expression

目的:构建含人IL-10全基因序列的原核表达载体,并进行表达及产物活性的鉴定。方法:利用RT-PCR方法,从人肝癌细胞系HepG2的总RNA中扩增IL-10的全长编码序列。编码序列经测序验证后,将其克隆入表达载体PET-28 a(+),构建IL-10基因的重组原核表达载体。在大肠杆菌中诱导表达目的蛋白,表达产物采用Western blot和ELISA进行鉴定。结果:表达产物主要位于包涵体内。经Western blot分析和ELISA检测显示,表达产物的相对分子质量(Mr)同预期的结果相符,有结合抗体活性。结论:成功地扩增人IL-10全基因序列,并构建了含该基因序列的原核表达载体,在大肠杆菌中高...

• 单位
  解放军第302医院