趋化素样因子1对肾癌细胞ACHN生物活性的影响及其相关机制

作者：宣成睿; 塔拉; 王翠艳; 徐晓艳^*

来源：科学技术与工程, 2022, 22(34): 15088-15094.

• 肾癌
• 趋化素样因子1
• 凋亡

多项研究发现，趋化素样因子1(chemokine-like factor 1,CKLF1)是人类多种肿瘤发生和进展的重要调节因子。然而，关于CKLF1对肾癌细胞生物活性的影响知之甚少。通过质粒转染实现CKLF1在肾癌细胞ACHN中过表达，探究CKLF1对肾癌细胞ACHN细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。将实验组pEGFP-N1-CKLF1和对照组pEGFP-N1真核细胞表达质粒分别转染肾癌ACHN细胞，实现趋化素样因子1在ACHN细胞中的过表达。利用荧光显微镜，镜下观察质粒转染效率。利用细胞计数试剂盒8(cell counting Kit-8,CCK8)观察肾癌细胞ACHN转染24、48、72 h后增殖情况；利用流式细胞术检测ACHN细胞转染24、48、72 h后细胞周期的变化情况；利用Hoechst33258染色法观察转染48 h后，ACHN细胞形态变化，利用流式细胞术检测各组细胞凋亡率。采用Western blot法检测CKLF1过表达后，细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、Bcl-2样蛋白1(Bcl-2 like 1,Bcl-xL)、信号传导及转录激活因子3(signal transducers and activators of transcription 3,STAT3)、磷酸化信号传导及转录激活因子3(phosphorylation signal transducers and activators of transcription 3,P-STAT3)表达情况。研究结果显示：荧光显微镜下90%以上的细胞有绿色荧光蛋白表达，证明转染效率良好。CCK8检测结果显示：转染48、72 h后，实验组肾癌细胞ACHN的增殖情况均明显高于对照组，差异有显著性意义48 h(P<0.05),72 h(P<0.05);流式细胞术检测结果显示：实验组增值指数PI明显高于对照组，差异有显著性意义24 h(P<0.01),48 h(P<0.01),72 h(P<0.01)。荧光显微镜下Hoechst染色结果显示：与对照组相比较，实验组凋亡小体数量较少。流式细胞术检测结果显示，与对照组相比较，转染后48 h后实验组细胞凋亡率明显降低(P<0.05)。Western blot结果：与对照组相比较，周期相关蛋白Cyclin D1表达明显高于对照组，差异有显著性意义(P<0.05);实验组凋亡相关蛋白Bcl-xL表达量明显高于对照组(P<0.05);实验组JAK激酶(Janus kinase, JAK/STAT3,JAK-STAT3)信号通路蛋白P-STAT3明显高于对照组(P<0.05)。趋化素样因子1过表达可促进肾癌细胞ACHN的增殖、抑制其凋亡，其发生机制可能与JAK-STAT3信号通路有关。CKLF1可能是肾透明细胞癌的新的治疗靶点。

• 单位
  内蒙古自治区人民医院; 内蒙古医科大学