Eg5抑制剂体外高通量筛选

作者:杨蕾; 江程; 刘飞; 尤启冬; 吴梧桐
来源:药物生物技术, 2008, (6): 418-424.
DOI:10.3969/j.issn.1005-8915.2008.06.002

摘要

建立筛选小分子新型抗肿瘤药物Eg5抑制剂的方法.提取HL60细胞总RNA,通过RT-PCR获得cDNA,构建原核表达质粒并转化大肠杆菌诱导表达蛋白.通过两步离子交换层析纯化蛋白,对小分子化合物库里的300个化合物进行筛选.MTT法以及免疫组化用于分析化合物的抑制肿瘤细胞增殖作用的机制.测序证实克隆得到的hEg5序列完全正确,SDS-PAGE检测与预测的分子量完全吻合.对小分子化合物库的筛选结果

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