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摘要
目的 原核表达和纯化腺相关病毒（AAV）衣壳保守区抗原肽，制备抗AAV衣壳保守区的兔多克隆抗体。方法 设计并合成编码AAV衣壳蛋白保守区的DNA，将序列克隆到载体pET30a，获得质粒pET30a-AAV-CR，原核表达并纯化保守区多价抗原肽，考马斯蓝染色法及Western blot法对AAV保守区多价抗原肽进行鉴定。将日本大耳朵白兔分为实验组与对照组（1只/组），实验组注射AAV保守区蛋白制备多克隆抗体，对照组注射PBS,ELISA检测抗体效价，Western blot及细胞免疫荧光法检测抗体应用效果。结果 成功构建了表达AAV衣壳保守区抗原肽的质粒pET30a-AAV-CR，表达纯化得到相对分子质量为17000的蛋白质；纯化后的蛋白可在兔体内诱导产生针对AAV衣壳保守区的抗体，且该抗体能广泛性识别AAV1-AAV10衣壳蛋白序列。结论 诱导出AAV衣壳保守区蛋白并成功获得了抗AAV衣壳保守区的多克隆抗体，为后续载体开发以及生物学功能研究奠定了基础。
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