NAD+介导的SIRT1去乙酰化活性在小鼠内毒素性急性肺损伤中的作用

作者：何思梦; 史佳; 李香云; 董树安; 张圆; 余剑波^*

来源：中华麻醉学杂志, 2021, 41(09).

• 内毒素血症
• 急性肺损伤
• NAD
• 抗衰老酶1
• 去乙酰化

目的评价烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)介导的沉默信息调节因子1(SIRT1)去乙酰化活性在小鼠内毒素性急性肺损伤(ALI)中的作用。方法 SPF级健康雄性C57BL/6小鼠25只, 6～8周龄, 体重20～25 g, 野生(WT)型10只, NAD+合成途关键酶烟酰胺单核苷酸腺苷酸转移酶1(NMNAT1)敲除(KO)型15只, 采用随机数字表法, 将WT型小鼠分为2组(n=5):对照组(WT+C组)和ALI组(WT+ALI组);将KO型小鼠分为3组(n=5):对照组(KO+C组)、ALI组(KO+ALI组)和ALI+ NAD+前体物质烟酰胺单核苷酸(NMN)组(KO+ALI+NMN组)。静脉注射LPS 15 mg/kg制备内毒素性ALI模型, KO+ALI+NMN组注射静脉注射LPS前1 h腹腔注射NMN 500 mg/kg。各对照组给予等容量生理盐水。注射LPS或生理盐水后12 h时, 取腹主动脉血标本行血气分析, 后处死小鼠留取肺组织, 测定肺湿重/干重(W/D)比值, 光镜下观察肺组织病理学改变, 并行肺损伤评分;采用ELISA法检测肺组织IL-6、IL-1β、TNF-α含量, 采用分光光度计法测定NAD+含量, 采用Western blot法测定肺组织SIRT1、乙酰化NF-κB (Ac-NF-κB)、乙酰化p53(Ac-p53)、乙酰化叉头框蛋白O1(Ac-FoxO1)、乙酰化过氧化物酶体增殖激活物受体γ辅激活因子(Ac-PGC1α)水平。结果与各C组比较, 各ALI组pH值和PaO2降低, PaCO2、肺W/D比值、肺损伤评分、肺组织IL-6、IL-1β、TNF-α和NAD+含量升高, SIRT1表达上调, Ac-NF-κB、Ac-p53、Ac-FoxO1和Ac-PGC1α表达下调(P<0.05)。与WT+ALI组比较, KO+ALI组pH值和PaO2降低, PaCO2、肺W/D比值、肺损伤评分、肺组织IL-6、IL-1β和TNF-α含量升高, NAD+含量降低, SIRT1表达下调, Ac-NF-κB、Ac-p53、Ac-FoxO1和Ac-PGC1α表达上调(P<0.05)。与KO+ALI组比较, KO+ALI+NMN组pH值和PaO2升高, PaCO2、肺W/D比值、肺损伤评分、肺组织IL-6、IL-1β和TNF-α含量降低, NAD+含量升高, SIRT1表达上调, Ac-NF-κB、Ac-p53、Ac-FoxO1和Ac-PGC1α表达下调(P<0.05)。结论 NAD+介导的SIRT1去乙酰化活性增强参与了小鼠内毒素性ALI时的内源性保护机制。

• 单位
  天津市南开医院; 南开大学; 天津医科大学