“Bolgogragsky”番茄cDNA文库的构建及质量评价

作者：张佳蕊; 郝娟; 张喜春^*

来源：安徽农业科学, 2022, 50(03): 92-101.

• 番茄
• 酵母双杂交
• cDNA文库
• SMART技术

MYB102转录因子在番茄响应低温胁迫中起着重要作用，为了进一步探究番茄转录因子MYB102的分子作用机理，筛选其蛋白，以“Bolgogragsky”为材料，从番茄的根、茎、叶、花、果以及萼片组织中提取总RNA,以其为模板合成双链cDNA,纯化后与载体pGADT7-Rec共转化入酵母Y187感受态细胞中构建酵母双杂交cDNA文库。经测定，文库容量为2.31×107 CFU,cDNA文库的转化效率为7.02×106 CFU/μg,文库滴度为2.5×108 CFU/mL,重组率为97%,插入的cDNA片段长度主要分布在250～2 000 bp。结果表明，构建的番茄cDNA文库符合酵母双杂交文库要求，可用于筛选MYB102的互作蛋白。

• 单位
  北京农学院