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摘要
雄性不育是植物中普遍存在的一种生物学现象，广泛的应用于杂种优势。前期研究发现当HcPDIL5-2a基因表达受到影响时，可以引起红麻雄性不育。为了了解，HcPDIL5-2a基因导致雄性不育的分子机制，本研究采用SMART和体外重组的方法，构建了红麻花药酵母双杂交三框cDNA文库，并利用酵母双杂交技术筛选了红麻雄性不育HcPDIL5-2a相关的互作蛋白。文库检测结果显示，插入的cDNA文库片段主要分布于1 000～2 000 bp，阅读框1、2、3的重组率分别为100%、95.7%、91.3%，转化后的酵母双杂交三框cDNA文库的库容为5×109 cfu，转化效率和滴度分别为7.72×106 cfu/ug和 1.0×108 cfu/mL，该文库符合酵母双杂交文库的筛选要求。此外，构建了pGBKT7-HcPDIL5-2a诱饵表达载体，毒性及自激活检测发现该诱饵载体对酵母没有毒性，也没有自激活活性。并利用酵母双杂交技术从酵母cDNA文库中筛选到11个蛋白与HcPDIL5-2a发生了互作，其中热激蛋白（Dna J/Hsp40）和钙调蛋白7（CaM 7） 两个蛋白可能与HcPDIL5-2a相互作用，共同调控红麻的雄性不育。本研究为红麻雄性不育基因互作蛋白筛选奠定了基础，同时也为阐明HcPDIL5-2a的导致雄性不育的分子机制提供一定的参考。
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