重型再生障碍性贫血模型小鼠骨髓间充质干细胞过度衰老的机制研究

作者：欧议清; 刘海燕; 陆伟; 闻梦静; 刘红

来源：中华血液学杂志, 2017, 38(04): 325-329.

• 贫血,再生障碍性
• 间质干细胞
• 衰老

目的探讨重型再生障碍性贫血(SAA)模型小鼠骨髓间充质干细胞(BM-MSC)过度衰老的机制。方法选择BALB/c小鼠40只,随机分为正常组20只、SAA组20只。应用白消安灌胃联合IFN-γ腹腔注射诱导建立SAA小鼠模型;分离培养两组小鼠的BM-MSC。观察BM-MSC细胞形态和细胞骨架;CCK-8和流式细胞术检测细胞增殖与细胞周期情况;比较衰老相关β-半乳糖苷酶(Senescence-associatedβ-Galactosidase,SA-β-gal)的染色阳性细胞比例;Western blot法检测mTOR蛋白的表达水平。结果正常组小鼠的BM-MSC细胞呈纺锤状、边界清晰,应力纤维平行排列、整齐;而SAA小鼠的BM-MSC细胞体积增大,呈平铺、边界不清状,应力纤维紊乱模糊。CCK-8结果显示,SAA小鼠的BM-MSC的增殖速率较正常组缓慢,在第2天开始差异有统计学意义(P<0.05)。SAA组小鼠BM-MSC的G0/G1期细胞比率[(77.461±1.567)%对(46.045±2.055)%,t=-34.384,P<0.001]、SA-β-gal阳性细胞比例[(75±11)%对(28±8)%,t=15.454,P<0.001]较正常组升高;SAA小鼠BM-MSC的mTOR表达水平高于正常小鼠。结论 SAA小鼠模型中BM-MSC是衰老的MSC,且mTOR通路激活可能是导致其衰老发生的机制。

• 单位
  南通大学附属医院