miR-129-5p靶向LARP1基因调控肺癌细胞顺铂耐药

作者：杨士杰; 刘春盛; 高丽环; 赵庆书; 刘孟奇

来源：西部医学, 2020, 32(09): 1298-1303.

• 肺癌细胞
• miR-129-5p
• LARP1
• 顺铂耐药
• 敏感性

目的探讨miR-129-5p能否通过调控La相关蛋白1(LARP1)表达,从而调节肺癌细胞对顺铂(DDP)的敏感性。方法通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白质印记(Western blot)检测肺癌细胞A549和肺癌顺铂耐药细胞A549/DDP中miR-129-5p、LARP1以及多药耐药相关蛋白1(MRP1)的表达水平。将A549/DDP分为对照组(NC)、miR-con组、miR-129-5p组、si-con组和si-LARP1组、miR-129-5p+pcDNA-con组、miR-129-5p+pcDNA-LARP1组。细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞存活率和对顺铂的半数抑制浓度(IC50)。Western blot检测细胞周期蛋白D1(CyclinD1)和MRP1蛋白表达。双荧光素酶报告基因实验和Western blot检测验证miR-129-5p和LARP1的靶向调控关系。结果与A549细胞相比,A549/DDP细胞中miR-129-5p的表达水平降低,LARP1和MRP1的表达水平升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与miR-con组比较,miR-129-5p组A549/DDP细胞存活率、IC50、CyclinD1和MRP1蛋白表达均降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与si-con组比较,si-LARP1组A549/DDP细胞存活率、IC50降低,CyclinD1和MRP1蛋白表达降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与miR-129-5p+pcDNA-con组比较,miR-129-5p+pcDNA-LARP1组A549/DDP细胞存活率、IC50升高,CyclinD1和MRP1蛋白表达升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。LARP1是miR-129-5p的靶基因。过表达miR-129-5p后LARP1蛋白表达降低,沉默miR-129-5p后LARP1蛋白表达升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 miR-129-5p通过靶向下调LARP1表达抑制肺癌细胞增殖,提高肺癌细胞的顺铂敏感性。