可溶性CD14在酵母细胞中的分泌表达与LPS结合活性分析

作者：侯本祥; 王慧; 张琛; 荫俊

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2006, 22(3): 399-401.

DOI：10.3321/j.issn:1007-8738.2006.03.040

• 可溶性CD14
• 分泌表达
• 毕氏酵母
• LPS

目的:在酵母系统中实现可溶性CD14基因的分泌表达,并进行LPS结合活性分析.方法:将可溶性CD14基因克隆入表达载体pPIC9K,用SacⅠ将重组质粒线形化,电转化Pichia pastoris GS115细胞,筛选阳性整合子并进行甲醇诱导表达.结果:经过诱导表达条件的优化,sCD14在pH 6.5培养基BMMY中实现了分泌表达.免疫印迹和酶联免疫检测结果显示,重组产物可以结合其特异抗体.经流式细胞仪检测,重组产物具有结合细菌内毒素(LPS)的生物学活性.结论:具有良好LPS结合活性的重组可溶性CD14分子可以用于进一步的结构与功能研究.

• 单位
  军事医学科学院; 首都医科大学