摘要

为揭示胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)热休克蛋白基因Cghsp90在抗逆境胁迫中的功能,利用RNAi技术结合PEG介导的原生质体转化方法,获得了Cghsp90的RNAi突变体菌株,经实时荧光定量PCR(q RT-PCR)对野生型菌株和突变体菌株间Cghsp90基因差异表达分析以及Na Cl、H2O2、SDS、Congo Red、18℃(cold)和33℃(hot)等非生物胁迫条件下野生型菌株和突变体菌株的胁迫耐受性分析。通过特异性引物检测鉴定、q RT-PCR分析,获得Cghsp90的RNAi突变体p Silent-1:Cghsp90-1和p Silent-1:C ghsp90-2;与野生型菌株相比,侵染过程中Cghsp90基因的表达量显著低于野生型菌株、8个致病相关基因显著下调表达;突变体菌株的产孢量下降、分生孢子畸形,萌发率下降;在非生物胁迫条件下,突变体菌株较野生型菌株更为敏感;在胶孢炭疽菌的分生孢子中研究Cghsp90基因的形态建成与萌发,对应变逆境胁迫以及调控致病相关基因等方面发挥重要的作用。