HLA-E基因慢病毒载体构建及其在肝癌HepG2细胞中的表达

作者：张彤; 方天翎; 李华; 聂常富; 蔡常洁; 许赤; 汪根树; 李玺; 易慧敏; 姜楠; 陈规划

来源：中国实用外科杂志, 2008, (03): 213-215.

DOI：10.3321/j.issn:1005-2208.2008.03.023

• 慢病毒
• 人类白细胞抗原-E
• 基因表达 lentivirus
• HLA-E
• gene expression

目的构建表达人类白细胞抗原-E(HLA-E)基因慢病毒载体,探讨慢病毒介导HLA-E基因在肿瘤免疫中的意义。方法2006年10月至2007年11月在中山大学附属第三医院肝移植中心应用pGC-E1-GFP-HLA-E慢病毒载体转导肝癌HepG2细胞,检测慢病毒载体的转导效率、细胞内HLA-E信使核糖核酸(mRNA)及蛋白质水平的表达。结果pGC-E1-GFP-HLA-E慢病毒载体转导肝癌HepG2细胞72h的转导效率为(95.0±1.3)%;通过RT-PCR检测24h后细胞内HLA-E mRNA水平是肝癌HepG2细胞的(8.73±1.05)倍,72h后为(293.48±42.01)倍,差异具有统计学意义(P<0.01)。细胞免疫组化显示转导HLA-E后细胞内的蛋白水平明显增强。结论慢病毒载体系统能够使转导的基因在靶细胞中得到稳定表达,是基因治疗中的理想载体。

• 单位
  中山大学附属第三医院; 中山大学; 广州医学院