柱前衍生化RP-HPLC测定铁皮石斛中的氨基酸的含量

作者：张亮; 鲁芹飞; 张扬; 徐香琴; 徐兰芳; 曾毅; 黄松^*

来源：中国实验方剂学杂志, 2014, 20(22): 61-65.

DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.2014220061

• 铁皮石斛
• 柱前衍生化
• 氨基酸
• 高效液相色谱法

目的:测定不同产地的铁皮石斛样品中氨基酸的含量。方法:样品以异硫氰酸苯酯(PITC)为衍生化试剂,与铁皮石斛中氨基酸柱前衍生,采用高效液相色谱法测定其含量,采用CAPCELL PAK C18SG300色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相[0.05 mol·L-1乙酸钠缓冲液(以乙酸调p H 6.5)-乙腈(1∶1)](A)-[0.05 mol·L-1乙酸钠缓冲液(以乙酸调p H6.5)](B)梯度洗脱,柱温25℃,流速0.6 m L·min-1,检测波长254 nm。结果:游离氨基酸和总的氨基酸的回收率范围分别为92.48%97.30%和90.95%95.63%,RSD都小于3.0%,9个不同产地的样品游离氨基酸的含量范围在0.210 5%0.571 2%,总的氨基酸含量范围在3.670 8%6.890 4%,必需氨基酸占总的游离氨基酸的比例为0.094 4%0.186 0%;必需氨基酸占总的氨基酸的比例范围为0.338 5%0.374 1%。结论:该方法灵敏、准确,具有良好的重复性和稳定性,可用于铁皮石斛中氨基酸的检测,不同产地的铁皮石斛样品其氨基酸的含量存在差异,必需氨基酸的比例也存在差异

• 单位
  东莞广州中医药大学中医药数理工程研究院; 广州中医药大学