线粒体活性氧在氟化钠诱导PC12细胞NF-κB/NLRP3信号通路活化中的作用

作者：陈德良; 张磊; 付长其; 舒适; 王国文; 彭巍^*

来源：中国兽医学报, 2023, 43(10): 2116-2122.

DOI：10.16303/j.cnki.1005-4545.2023.10.18

• 氟化钠
• 线粒体活性氧
• 核因子-κB
• NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3

旨在探究氟化钠(NaF)对PC12细胞NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎性小体的影响以及线粒体活性氧(mtROS)/核因子κB(NF-κB)信号在其中的调节作用。以PC12细胞为研究对象，分别转染NLRP3 siRNA、孵育NF-κB通路抑制剂PDTC(50μmol/L)或mtROS清除剂Mito-TEMPO(500μmol/L),并给予质量浓度为80 mg/L的NaF刺激24 h。通过CCK-8法检测细胞存活率，mitoSOX荧光探针检测mtROS水平，比色法测定乳酸脱氢酶(LDH)活性，ELISA法检测白细胞介素(IL)-18和IL-1β分泌，Western blot检测磷酸化NF-κB p65、磷酸化I-κB激酶β(iKKβ)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、胱天蛋白酶1(Caspase-1) p20蛋白表达，免疫荧光测定NF-κB p65的入核。与NaF组比较，NLRP3 siRNA干预显著降低了NaF暴露引起的NLRP3和Caspase-1 p20蛋白表达水平升高(P<0.01),缓解了NaF诱导的细胞存活率降低(P<0.01)、减弱了培养液上清中LDH活性以及IL-1β和IL-18的分泌水平(P<0.01)。与NaF组比较，PDTC+NaF组细胞中p-NF-κB p65和p-iKKβ水平降低(P<0.01),NF-κB p65的入核被阻断。此外，Mito-TEMPO干预后，NaF处理细胞中的mtROS、p-NF-κB p65、p-iKKβ、NLRP3、IL-1β和IL-18水平均降低(P<0.01)。NaF引起的PC12细胞NF-κB/NLRP3信号通路活化与mtROS水平升高有关。

• 单位
  医药学院; 河南牧业经济学院; 青海省畜牧兽医科学院