小清蛋白中ErbB4免疫荧光染色条件的优化

作者：耿迟; 陈幽婷; 侯筱宇

来源：生物技术, 2017, 27(06): 586-591.

DOI：10.16519/j.cnki.1004-311x.2017.06.0094

• PV
• ErbB4
• 免疫荧光
• 后固定
• 抗原修复
• 一抗

[目的]探究免疫荧光标记小清蛋白（parvalbumin,PV）阳性神经元中ErbB4的最佳实验条件。[方法]小鼠海马组织,PV和ErbB4做免疫荧光染色,通过激光共聚焦观察多聚甲醛后固定时间、抗原修复和一抗孵育时间对PV和ErbB4免疫荧光检测效果的影响。[结果]多聚甲醛后固定不同时间（8 h、48 h和240 h）,一抗孵育40 h,结果显示,随着后固定时间的延长,PV和ErbB4的荧光强度和数量逐渐降低（P<0.05）。后固定240 h的脑组织,抗原修复后,PV和ErbB4荧光强度和数量显著升高（P<0.05）。一抗孵育12 h检测到PV和ErbB4荧光强度明显低于40 h（P<0.05）,ErbB4阳性神经元的数量低于40 h（P<0.05）。[结论]PV阳性神经元中ErbB4的免疫荧光染色的最佳条件是后固定8 h、一抗孵育40 h。对于多聚甲醛后固定较久的组织,抗原修复能够提高其染色效果。

• 单位
  徐州医科大学; 解剖学教研室