白念珠菌果糖二磷酸醛缩酶重组蛋白的制备及鉴定

作者：陆静芬; 李芳秋; 史利宁; 王颖

来源：临床检验杂志, 2011, (05): 375-377.

DOI：10.13602/j.cnki.jcls.2011.05.004

• 白念珠菌
• 果糖二磷酸醛缩酶
• 基因克隆
• 原核表达 Candida albicans
• fructose-bisphosphate aldolase
• gene cloning
• prokaryotic expression

目的制备有免疫原性的白念珠菌果糖二磷酸醛缩酶(fructose-bisphosphate aldolase,Fba1)重组蛋白。方法以白念珠菌C1标准株基因组DNA为模板,用PCR法扩增Fba1 DNA序列,与克隆载体pMD18-T连接、测序,再与原核表达载体pET28a( )连接,构建成重组表达质粒pET28a( )/Fba1,转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导重组融合蛋白表达,亲和层析柱纯化重组蛋白。用抗His标签的单克隆抗体鉴定融合蛋白,并用确诊为侵袭性白念珠菌病(ICAI)、且抗白念珠菌烯醇化酶抗体阳性的患者血清进行抗原性鉴定。结果 Fba1 DNA序列与GenBank中的...

• 单位
  中国人民解放军东部战区总医院; 南京大学