一种蛋白质质谱分析中快速胍基化新方法

作者：王雪颖; 张养军; 王昕; 佟巍; 秦伟捷; 毛心丽; 钱小红

来源：质谱学报, 2011, (05): 257-264+270.

• 胍基化
• 微波辅助
• 肽
• 蛋白质定量 guanidination
• microwave-assisted
• peptides
• protein quantification

胍基化修饰在蛋白质组学鉴定及定量研究中发挥着重要的作用,本研究建立了一种蛋白质质谱分析中微波辅助快速胍基化的新方法。采用标准肽段系统地优化了反应溶剂pH值、O-甲基异脲的浓度及微波加热时间,发现标准肽段在pH 12的氨水溶液中,O-甲基异脲的浓度为1.5mol/L,微波高火加热1min的胍基化效率为99%。将此方法应用于马心肌红蛋白和牛血清白蛋白胰蛋白酶酶切肽段,质谱检测结果表明,含赖氨酸肽段的平均胍基化效率(95%)大于文献报道的平均胍基化效率(85%)。与传统水浴加热胍基化方法相比,微波辅助加热胍基化方法缩短了反应时间,提高了反应效率,降低了肽段N端副反应。

• 单位
  蛋白质组学国家重点实验室; 北京蛋白质组研究中心; 中国人民解放军防化学院; 沈阳药科大学; 军事医学科学院放射与辐射医学研究所