摘要

目的建立以橙皮苷为替代对照品测定甘草流浸膏中甘草苷和甘草酸含量的高效液相色谱法。方法采用替代对照品内加入法,以橙皮苷为替代对照品,通过测定甘草酸铵与橙皮苷、甘草苷与橙皮苷的相对校正因子(f值),利用f值计算甘草流浸膏中甘草苷和甘草酸含量。色谱条件:Welch Ultimate C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),以乙腈-0.1%三乙胺溶液(用磷酸调pH值为2.5)为流动相,梯度洗脱,检测波长为284nm(橙皮苷)、276nm(甘草苷)、252nm(甘草酸铵),柱温为30℃,流速为1.0 mL/min。结果橙皮苷、甘草苷、甘草酸铵进样量分别为0.033 2~0.498 3、0.049 3~0.740 2、0.433 0~6.495 1μg,与其峰面积具有良好的线性关系(r=0.999 5、0.999 2、0.999 3);甘草苷和甘草酸铵与橙皮苷的f值分别为1.081 4、0.449 2;甘草苷和甘草酸的平均回收率分别为98.96%、97.67%。替代对照品法样品含量测定数据与外标法比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论以橙皮苷为对照品,测定甘草流浸膏中甘草苷和甘草酸含量的高效液相色谱法具有成本低、实验时间短、操作过程和仪器噪音影响小等特点。