稳定敲低SIGIRR的人肾小管上皮细胞的构建及其初步功能的研究

作者：蒋克国; 王德光; 周海胜; 查晓军; 张桂霞; 金福泉; 季爽; 潘海峰; 叶冬青; 郝丽

来源：安徽医科大学学报, 2015, (02): 129-135.

DOI：10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2015.02.001

• 狼疮性肾炎
• 人肾小管上皮细胞
• SIGIRR
• 慢病毒载体
• NF-κB
• 趋化因子 lupus nephritis
• human renal tubular epithelial cells
• SIGRR
• lentiviral vector
• NF-κB
• chemokine

目的建立稳定敲低单免疫球蛋白白介素1相关受体(SIGIRR)基因的人肾小管上皮细胞株(HKC),并初步研究其功能。方法针对SIGIRR基因的有效靶点设计shRNA序列,与GV248-GFP-Puro慢病毒载体连接产生重组体(GV248-GFP-Puro-sh SIGIRR)。将测序验证正确的重组体与包装质粒(p MDL、pRev、p VSVG)共转染293T细胞进行病毒包装,收集病毒并感染HKC细胞。实时荧光定量PCR(qRTPCR)和Western blot法分析检测HKC细胞中SIGIRR干涉效率。应用白细胞介素-1β(IL-1β)刺激成功敲低SIGIRR的HKC细胞及对照细胞,Weste...

• 单位
  安徽医科大学; 安徽医科大学第二附属医院