不同活性的survivin基因启动子片段的克隆及鉴定

作者:钟波; 叶枫; 王涛; 姜帆; 梁后杰; 庞学利; 邹仲敏
来源:第三军医大学学报, 2011, (11): 1115-1118.
DOI:10.16016/j.1000-5404.2011.11.029

摘要

目的检测survivin在成体干细胞等细胞中的表达差异,克隆并比较3种不同片段长度survivin启动子的活性。方法取成纤维母细胞10T1/2、成肌母细胞C2C12、真皮多能干细胞DMSC、人骨髓间充质干细胞BMSC、结肠腺癌细胞HT29、人胚肾母细胞293FT进行培养。用RT-PCR和免疫细胞化学染色检测survivin在成体干细胞和肿瘤细胞中的表达;用基因组DNA PCR和分子克隆等方法,构建不同长度的survivin基因启动子驱动荧光素酶报告基因表达的载体,经脂质体转染293FT细胞,测定相对荧光素酶活性以反映启动子活性。结果 survivin基因在正常成体干细胞中低表达,在成肌母细胞中...

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