miR-185-5p抑制支气管上皮细胞16HBE增殖的作用机制

作者：王海霞; 秦绪慧; 薛璐^*

来源：中南民族大学学报(自然科学版), 2021, 40(06): 579-585.

• miR-185-5p
• 胎盘特异蛋白8
• 3′UTR
• 增殖

目的:研究miR-185-5p抑制支气管上皮细胞16HBE增殖的调控作用及其机制.方法:用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测了A549和16HBE细胞内miR-185-5p和PLAC8 mRNA的表达量,用Lipofectamine 3000转染miR-185-5p mimics到16HBE细胞中,用双荧光素酶活性实验检测了miR-185-5p对PLAC8的靶向性.用MTT检测了miR-185-5p对16HBE细胞增殖的影响,用流式细胞术检测了细胞周期分布,用Western blotting检测了细胞内蛋白表达水平.结果:miR-185-5p在正常人肺支气管上皮细胞16HBE中的表达水平低于肺癌细胞A549(P<0.05);将16HBE细胞转染不同浓度的miR-185-5p mimics, 16HBE细胞的增殖活性随着miR-185-5p mimics浓度升高而下降(P<0.05).通过生物信息学预测PLAC8可能是miR-185-5p的一个靶基因.16HBE细胞中PLAC8的表达量高于A549(P<0.05).与转染NC对照组比较,转染不同浓度梯度的miR-185-5p mimics到16HBE细胞后48 h,细胞内PLAC8 mRNA含量和蛋白表达量明显降低(P<0.05).双荧光素酶活性结果表明miR-185-5p与PLAC8 3′UTR结合后抑制其表达.miR-185-5p使细胞周期阻滞在S期,抑制了细胞内c-Myc、CDK2、CyclinA2、P21、p-Cdc2蛋白的表达.结论:miR-185-5p可能通过抑制PLAC8基因表达,抑制16HBE细胞的增殖活性.

• 单位
  中南民族大学; 生命科学学院