摘要

[目的]建立快速、灵敏、特异的饮用水大肠菌群荧光定量PCR定量检测方法。[方法]以大肠菌群的lacZ基因为检测靶基因,设计荧光定量PCR引物和Taqman-MGB探针,建立荧光定量PCR定量反应体系,并评价荧光定量PCR方法的灵敏度、特异性、重复性。[结果]建立大肠菌群的荧光定量PCR检测方法。25μl荧光定量PCR反应体系主要成分浓度分别为Mg2 5.0mmol/L,dNTPs0.2mmol/L,引物0.2μmol/L,探针0.5μmol/L,4×ROX参比荧光染料0.5μl,Taq DNA聚合酶2.0U,模板5μl。方法可检出每微升单个拷贝大肠菌群模板,方法的特异性、重复性良好。[结论]荧...