JNK/AP–1通路在柚皮素抑制RSV感染引起气道黏液高分泌中的作用

作者：孟珊珊; 吴艳玲; 胡晓光; 张海邻^*; 李昌崇

来源：中华儿科杂志, 2015, 53(03): 182-186.

• 呼吸道合胞病毒
• 黏液
• 黏蛋白5AC
• 柚皮素

目的探讨JNK/AP–1通路在柚皮素抑制呼吸道合胞病毒(RSV)感染引起气道黏液高分泌中的作用。方法通过RSV A2株感染人肺腺癌上皮(A549)细胞,细胞维持液培养为细胞对照组,细胞中加入不同MOI的RSV吸附2 h为RSV感染组(R1、R2、R3组MOI分别为0.5、1.0、5.0),在RSV感染前加入柚皮素(Nar)预处理1 h为Nar干预组(N1组为Nar 30 μmol/L+RSV、N2组为Nar 100 μmol/L+RSV),不同浓度的Nar培养液培养为Nar组(N3、N4组的Nar分别为30 μmol/L和100 μmol/L),含0.1%的二甲基亚砜的细胞培养液培养细胞为DMSO组(D组),用10 μmol/L的JNK通路阻断剂SP600125预处理1 h后加用MOI=1.0的RSV感染2 h,感染后加入细胞维持液为SP600125干预组(S组)。采用实时荧光定量PCR、ELISA检测各组细胞黏蛋白(MUC)5AC的表达情况;采用Western blot检测JNK、P–JNK、AP–1蛋白的表达水平。结果 RSV感染组MUC5AC mRNA及蛋白表达水平均高于细胞对照组(P<0.05),且随病毒感染量的增加,MUC5AC基因及蛋白表达量也逐渐增加。Nar干预组与RSV感染组相比,MUC5AC mRNA和蛋白水平降低,随Nar浓度增加,降低更为明显,呈剂量相关性(P<0.05)。R2组p–JNK、AP–1蛋白相对表达量分别为3.31±0.34、1.94±0.05,显著高于细胞对照组(均为1.00±0.00)(P<0.05)。N2组、S组p–JNK蛋白相对表达量为2.10±0.27、1.97±0.16,AP–1蛋白表达量为1.40±0.03、1.36±0.05,均较R2组下降(P<0.05)。N2组和S组MUC5AC蛋白表达量为(43.17±1.06) μg/L、(44.02±0.99) μg/L,差异无统计学意义(P>0.05),但两组均低于R2组(48.19±0.47) μg/L(P<0.05)。结论 RSV A2株感染A549细胞会导致黏蛋白MUC5AC基因转录和蛋白表达增加,JNK/AP–1通路在柚皮素抑制RSV感染引起的气道黏液高分泌中起调控作用。

• 单位
  邹城市人民医院; 温州医科大学