人脐带间充质干细胞在大鼠睾丸间质内向Leydig细胞分化的实验研究

作者：张志远; 刘坤; 邢晓宇; 琚官群; 钟量; 孙杰

来源：中华男科学杂志, 2016, 22(08): 680-685.

DOI：10.13263/j.cnki.nja.2016.08.002

• 人脐带间充质干细胞
• Leydig细胞
• 睾丸微环境
• 细胞分化
• 大鼠

目的:研究人脐带间充质干细胞(HUMSCs)在大鼠睾丸间质内向Leydig细胞分化的可行性。方法:贴壁法获得HUMSCs,分别通过流式细胞表面抗原染色与三系分化验证其纯度与多向分化能力,用CM-Dil标记HUMSCs后将其移植入大鼠睾丸间质内,并在移植后4周与8周对大鼠睾丸进行免疫荧光染色观察HUMSCs的存活与分化情况,移植后8周获得大鼠睾丸细胞悬液,通过流式细胞染色检测HUMSCs表达Leydig细胞标志物3β-HSD判断细胞分化的效率,通过流式细胞分选获得悬液内CM-Dil标记的在睾丸内分化后的HUMSCs,并对其进行培养,培养3 d后收集培养液,检测其睾酮水平。结果:Leydig细胞标志物CYP11a1在HUMSCs移植8周后有表达,而在移植4周后未见表达。3β-HSD流式染色显示其分化效率约为14.5%,流式细胞分选后细胞可存活,且其培养液内能检测出睾酮。结论:HUMSCs在大鼠睾丸间质内可向Leydig细胞分化。

• 单位
  上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心; 曲靖市第一人民医院