耐环丙沙星鲍氏不动杆菌中喹诺酮耐药相关基因分析

作者：周振江; 罗燕萍; 郭景玉; 吕瑞辰; 李艳君; 杨瑞馥; 黄新祥; 宋亚军

来源：军事医学, 2014, 38(07): 510-513.

• 环丙沙星
• 鲍氏不动杆菌
• 喹诺酮耐药决定区
• 质粒介导喹诺酮耐药

目的研究鲍氏不动杆菌(ABA)临床分离株对喹诺酮类抗生素耐药机制。方法收集来自6家医院的114株耐环丙沙星ABA临床分离菌株,PCR扩增喹诺酮类抗生素结合靶基因(gyrA、gyrB、parC和parE),并进行序列测定,与参考菌株ATCC17978基因组进行比对,确定其喹诺酮耐药决定区是否存在耐药相关突变;PCR扩增9个质粒介导的喹诺酮类耐药基因[qnrA、qnrB、qnrC、qnrD、qnrS、qepA、aac(6’)-Ⅰb-cr、oqxA和oqxB],并对阳性扩增产物进行测序以确定基因亚型。结果绝大部分菌株(113/114,99.1%)的gyrA基因发生了Ser83Leu突变,其中67株菌(67/114,58.8%)同时发生了parC基因的Ser80Leu突变,以上两种突变是常见的喹诺酮耐药相关突变。与标准菌株进行比对,受试菌株gyrB基因Arg393Ser、Arg393Cys、Thr401Ala、Pro406Ser、Val430Phe、Cys440Ser和Gly480Arg突变率分别为95.6%、0.9%、96.5%、96.5%、100%、96.5%和96.5%;parE基因在7个位点发生了同义突变,突变率>96%。83.3%(95/114)的菌株中检出aac(6’)-Ⅰb基因,但不存在"cr"突变,其余质粒介导的喹诺酮类耐药基因扩增均为阴性。结论该研究耐环丙沙星ABA中未发现质粒介导的喹诺酮耐药基因,在gyrB和parE基因中发现的突变可能与环丙沙星耐药性无关,实验菌株的环丙沙星耐药性主要与染色体上的喹诺酮耐药决定区GyrASer83Leu和ParC-Ser80Leu两种突变相关。

• 单位
  江苏大学; 病原微生物生物安全国家重点实验室; 解放军总医院; 军事医学科学院; 中国人民解放军海军总医院