犬ANP32蛋白多态性及其对A型流感病毒RNA聚合酶活性的影响

作者：张媛; 于萌萌; 孙留克; 郭兴; 那雷; 刘荻萩; 姜骞; 张海丽^*; 王晓钧^*

来源：中国畜牧兽医, 2022, 49(07): 2462-2473.

DOI：10.16431/j.cnki.1671-7236.2022.07.004

• A型流感病毒(IAV)
• 犬酸性核磷蛋白32(caANP32)
• MDCK细胞
• 聚合酶活性

【目的】探索犬酸性核磷蛋白32(canis acidic (leucine-rich) nuclear phosphoprotein 32 ku, caANP32)对不同物种A型流感病毒(Influenza A virus, IAV) RNA聚合酶活性的影响。【方法】利用实时荧光定量PCR方法分析caANP32家族基因(caANP32A、caANP32B及caANP32E)的组织分布并对其进行扩增和克隆，评估caANP32家族蛋白对不同物种A型流感病毒RNA聚合酶活性的支持作用。【结果】caANP32家族基因在不同组织中分布相似，其中caANP32B基因组织丰度显著或极显著高于caANP32A和caANP32E基因(P<0.05;P<0.01),在心脏、盲肠和大脑中caANP32E基因组织丰度极显著或显著高于caANP32A基因(P<0.01;P<0.05),在肝脏、肺脏等组织中caANP32E与caANP32A基因丰度均无显著差异(P>0.05)。在犬心脏组织和MDCK细胞中发现，caANP32A基因仅存在1个转录本，caANP32B基因存在3个不同剪接变体：caANP32B＿X1、caANP32B＿X2和caANP32B＿X3;caANP32E基因具有2个不同剪接变体：caANP32E＿X1和caANP32E＿X2。通过分析ANP32家族蛋白对不同物种A型流感病毒RNA聚合酶活性的影响发现，caANP32A和caANP32B均能支持犬流感病毒(H3N2GD11)和马流感病毒(H3N8JL89)RNA聚合酶活性，而对禽流感病毒(H9N2ZJ12)RNA聚合酶活性支持较低。caANP32B＿X2剪接变体对哺乳动物流感病毒RNA聚合酶活性的支持能力显著高于caANP32B＿X1和caANP32B＿X3(P<0.05);而caANP32E不支持A型流感病毒RNA聚合酶活性。【结论】本研究初步解析了caANP32家族蛋白的组织分布及序列多态性，阐明了其对不同物种A型流感病毒RNA聚合酶活性的支持作用，为解析MDCK细胞作为流感病毒分离和疫苗生产细胞系的分子机制提供了新的借鉴。

• 单位
  兽医生物技术国家重点实验室; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 吉林大学