摘要

目的观察宫颈癌Siha细胞在临床常规分割放疗模式的电离辐射诱导后上皮间质转化(EMT)的发生情况, 以及外泌体在此过程中的作用。方法利用临床常规分割外照射(6 MV-X射线, 50 Gy/25次)模式的电离辐射处理宫颈鳞癌细胞系Siha, 通过形态学观察、EMT标志物检测和Transwell小室实验评价Siha细胞EMT的发生;分离纯化细胞上清液中外泌体, 利用透射电镜、纳米粒径示踪分析(NTA), 观察其形态与分泌量;最后加入抑制剂GW4869(10 μmol/L)明确外泌体作用。结果经电离辐射处理后, 存活的Siha细胞发生了EMT现象:梭形间质样细胞出现, 上皮标志物E-cadherin表达下调(t=9.66, P<0.05), 间质标志物N-cadherin表达上调(t=41.61, P<0.05), Transwell穿膜和穿透基质胶的细胞数目增多(t=6.11、13.22, P<0.05)。此外, 辐射诱导后, Siha细胞外泌体分泌增加(t=7.51, P<0.05), 而GW4869负性调控后, 其细胞外泌体的分泌随之减少(t=7.28, P<0.05), 电离辐射诱导的EMT也发生了逆转。结论临床常规分割放疗模式的电离辐射可通过诱导外泌体的分泌促进宫颈癌Siha细胞上皮间质转化。