摘要
目的:探究SBY-BOX转录因子5(SOX5)基因在胶质瘤组织中的表达及对胶质瘤细胞株U87增殖活性和侵袭能力的影响。方法:胶质瘤和正常脑组织标本各取10例,采用实时定量荧光PCR(RT-PCR)、蛋白质免疫印迹法(Western blotting)检测SOX5基因的表达,培养胶质瘤细胞株U87,将其分为对照组、无义序列组和siRNA SOX5转染组。利用CCK8实验和Transell实验检测胶质瘤细胞株U87增殖活性及侵袭能力。利用Western印迹检测敲低SOX5表达后对基质金属蛋白酶(MMP-2)、MMP-9以及细胞周期蛋白D1(CyclinD1)表达的影响。结果:与正常脑组织相比,胶质瘤组织中SOX5蛋白和mRNA水平均明显升高(t=23.38、18.36,均P<0.01)。siRNA SOX5可有效敲低SOX5基因的表达,与对照组、无义序列组比较,siRNA SOX5转染组SOX5蛋白和mRNA水平均明显降低(F=89.31、123.34,均P<0.01);CCK8实验结果显示,敲低SOX5表达后,胶质瘤细胞的增殖活性受抑制,第120小时胶质瘤细胞增殖活性仅为对照组的31.8%(F=553.62,P<0.05);Traswell实验结果显示,siRNA SOX5转染组穿过小室膜细胞数为9.22±0.91,与对照组(19.62±1.10)、无义序列组(18.56±1.21)相比明显降低,仅为对照组的46%(F=89.36,P<0.01)。与对照组和无义序列组相比,siRNA SOX5转染组MMP-2、MMP-9以及CyclinD1基因表达均明显下降(F=853.21、602.30、311.46,均P<0.01)。结论:SOX5在胶质瘤组织中表达异常升高,敲低SOX5表达后能明显抑制胶质瘤细胞的增殖活性和侵袭能力,SOX5在胶质瘤中可能通过调控MMP-2、MMP-9以及CyclinD1基因表达发挥促癌基因的作用。
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单位天津医科大学总医院