摘要
目的探讨Gemin3基因表达在细胞凋亡中的作用及途径。方法采用免疫共沉淀、谷胱甘肽-S转移酶共沉淀实验确定Gemin3与p53两种蛋白在体内、体外相互结合及相互作用的结构域。荧光素酶报告基因检测转染Gemin3基因对p53基因的影响,依靠慢病毒载体介导小干扰RNA敲低Gemin3基因的表达,并经嘌呤霉素筛选获得稳定的Gemin3低表达细胞系,实时定量PCR检测Gemin3敲低对p53及其下游基因在转录水平的影响,流式细胞术检测Gemin3敲低对细胞凋亡的影响。结果 Gemin3的C端与p53的中部DNA部位相互结合。将p53报告基因、p53蛋白基因以及逐渐增量的Gemin3基因共转染Saos-...
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单位中国医科大学附属第一医院