正交实验设计优化白木香ISSR-PCR反应体系的研究

作者：申彦晶; 赵翾; 赵树进

来源：药物生物技术, 2008, (01): 31-34.

DOI：10.19526/j.cnki.1005-8915.2008.01.008

• 正交设计
• ISSR-PCR
• 白木香 Orthogonal design
• ISSR-PCR
• Aquilaria sinensis(Lour.) Spreng

利用正交实验设计的方法,对白木香ISSR-PCR(简单重复序列区间-多聚酶链式反应)反应体系中的5种主要因素(dNTP、Mg2 、模板DNA、引物和Taq酶)在4个水平上进行优化筛选,建立了白木香ISSR-PCR反应的最佳体系(25μl)为:dNTP 0.2 mmo1/L、Mg2 2.5 mmol/L、引物0.5μmol/L、模板DNA 100 ng和Taq酶1.0 U。通过梯度PCR反应得到相应引物的最佳退火温度为49.2℃。这一体系的建立为今后利用ISSR标记技术研究白木香的遗传多样性提供了标准化程序。

• 单位
  仲恺农业工程学院; 广州军区广州总医院