樱花素通过拮抗肠上皮细胞凋亡减轻小鼠克罗恩病样结肠炎与调控TLR4信号有关

作者：赵雅静; 张文静; 张诺; 徐梦宇; 杨子; 张小凤^*

来源：中国病理生理杂志, 2023, 39(09): 1634-1641.

• 克罗恩病
• 樱花素
• 肠屏障
• 细胞凋亡
• Toll样受体4

目的：明确樱花素(SK)对2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的小鼠克罗恩病(CD)样结肠炎的作用及可能的分子机制。方法：将24只C57BL/6J小鼠随机分为对照(control)组、模型组(TNBS组)和SK(20 mg·kg-1·d-1)干预组，每组8只。采用疾病活动度指数(DAI)、体质量变化评估各组小鼠肠炎症状。以结肠长度、炎症评分及肠黏膜炎症介质肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、IL-17A和IL-1β水平评估结肠炎症程度。通过测量外周血4 kD异硫氰酸荧光素-葡聚糖(FD4)和肠型脂肪酸结合蛋白(I-FABP)水平、跨上皮电阻(TEER)及肠道细菌移位率评估小鼠肠屏障功能。采用GO功能富集分析和KEGG通路富集分析预测SK可能的作用途径和机制，并用动物实验进行验证。结果：SK干预组小鼠DAI评分和体质量显著低于TNBS组，但高于control组(P<0.05)。SK干预组小鼠结肠缩短，组织学炎症评分和肠黏膜TNF-α、IL-6、IL-17A和IL-1β水平较TNBS组显著降低，但仍高于control组(P<0.05)。SK干预组小鼠外周血FD4和I-FABP水平显著低于TNBS组，但仍高于干预组(P<0.05)，而TEER值则相反(P<0.05)。SK干预组小鼠肠道细菌移位到肝脏、脾脏及肠系膜淋巴结的比例显著低于TNBS组，但仍高于control组(P<0.05)。GO功能富集和KEGG通路富集分析提示SK的作用可能与细胞凋亡和Toll样受体(TLR)信号相关。TUNEL染色显示SK干预组肠上皮细胞凋亡比例较TNBS组显著下降，但仍高于control组(P<0.05)。Western blot实验显示，SK干预组结肠黏膜组织中Bcl-2表达水平显著低于TNBS组，仍高于control组(P<0.05)；而Bax/cleaved caspase-3 (C-caspase-3)比值则相反(P<0.05)。此外，SK干预组TLR4、MyD88及p-NF-κB p65蛋白水平较TNBS组均显著降低，但仍高于control组(P<0.05)。结论：SK拮抗肠上皮细胞凋亡从而减轻CD样肠炎小鼠肠屏障功能障碍和肠炎症状可能与抑制TLR4信号激活有关。

• 单位
  蚌埠医学院第一附属医院