乌梅总黄酮对MPP+诱导SH-SY5Y细胞线粒体损伤的保护作用

作者：王春玲; 罗宁; 文晓东^*; 蒋媛静; 刘钰; 冯文勇

来源：重庆医学, 2022, 51(12): 1981-1986.

• 帕金森病
• 乌梅总黄酮
• 1-甲基-4-苯基吡啶离子
• 钙调蛋白激酶
• 腺苷酸活化蛋白激酶
• 线粒体

目的 探讨乌梅总黄酮(FMF)对神经毒素1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)诱导人神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞建立的帕金森病(PD)细胞模型钙调蛋白激酶(CaMKKβ)/腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)通路的调控作用及对SH-SY5Y细胞线粒体功能的影响。方法 250μmol/L MPP+作用于SH-SY5Y细胞24 h后，建立PD体外细胞模型，将细胞分为5组：对照组(只加SH-SY5Y细胞，不加药物)、模型组(250μmol/L MPP+孵育24 h)、FMF低剂量组(MPP++FMF 10μmol/L)、FMF中剂量组(MPP++FMF 50μmol/L)和FMF高剂量组(MPP++FMF 100μmol/L)。CCK-8法检测细胞的存活率，JC-1染色检测线粒体膜电位(ΔΨm);Western blot检测CaMKKβ/AMPK信号通路相关CaMKKβ、AMPK及磷酸化CaMKKβ(p-CaMKK)、磷酸化AMPK(p-AMPK)表达水平。结果 CCK-8检测结果显示，FMF预处理24 h后，FMF低、中、高剂量组MPP+损伤细胞的存活率均较模型组明显升高(P<0.05或P<0.01)。ΔΨm检测结果显示，与对照组相比，模型组细胞ΔΨm明显降低(P<0.001);与模型组相比，FMF低、中、高剂量组ΔΨm明显升高(P<0.001)。Western blot检测结果显示，与对照组比较，模型组p-CaMKKβ、p-AMPK表达水平均明显下降(P<0.01);与模型组比较，FMF低、中、高剂量组p-CaMKKβ、p-AMPK表达水平均明显上调(P<0.05或P<0.01)。FMF干预前、后各组间CaMKKβ、AMPK表达水平比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 FMF可减轻MPP+对SH-SYSY细胞的损伤，这种保护作用可能是通过激活CaMKKβ/AMPK通路，改善线粒体功能实现的。

• 单位
  广西中医药大学; 神经内科; 广西中医药大学附属瑞康医院